Innholdsfortegnelse

Introduksjon

• Enzymarbeid
• Radioaktivtet
• Løsningsmidler
• Bakterier og gjær

Kloning og DNA-teknikker

• Bestemmelse av DNA-konsentrasjon
• Plasmidprep fra E. coli - Alkalisk lysis
• Plasmidprep fra E. coli - Kokemetode
• Restriksjonskutting
• Agarose gelelektroforese
• Isolere DNA fra agarosegel
• Etanolfelling av DNA
• PCR
• Rense PCR-produkt
• Fosfatasebehandling med SAP
• Ligering
• Kompetente DH5a
• Kompetente BL21 - CaCl2 metoden
• Transformasjon av E.coli
• Kolonihybridisering
• Sekvensering
• Stamkultur

Oligo-teknikker

• Rensing av enkeltrådig oligo
• Rensing av dobbeltrådig oligo på PA-gel
• Rensing av dobbeltrådig oligo med gelfiltering
• Kinasering av oligo med g -32P-ATP
• Annealing - dannelse av dsDNA
• Fill-in
• Kvantitering - beregning av inkorporering og konsentrasjon

Protein - teknikker

• Beregning av proteinkonsentrasjon
• Uttrykking av protein i E. coli
• Rensing på Gradi Frac
• Gelfiltrering - desalting av protein
• SDS-PAGE
• Phast Gel
• Disulfidbro dannelse
• Fosforylering
• Western blotting

Protein-DNA interaksjon

• EMSA - "Electroforetic Mobility Shift Assay"
• EMSA - Decay med ikke-radioaktiv spesifikk oligo
• EMSA - Konkurranse med uspesifikk oligo
• EMSA - Teste red-oks sensitivitet
• Phosphor imaging av EMSA-geler
• Footprinting

Gjær

• Transformering
• b -gal filter assay
• ONPG-tester
• Plasmid rescue
• Celleekstrakt

Diverse

• Fremkalling
• Polyakrylamidgel

Oppskrifter

• Buffere og løsninger
• Medier til bakterier og gjær
• Elektroforesebuffere