UiO hjemmeside
Molkylærbiologi
Reglement for Laboratorietarbeid ved studieretning genetikk
Biologisk institutt

 

[ Avd. for molekylærbiologi | Studieretning genetikk ]

Reglement for labarbeid ved studieretning genetikk ved Avd. for molekylærbiologi -Nor

Protocols used at Gene Lab, Division of Molecular Biology Standard DNA techniques
Agarosegel separation of DNA -Eng
Isolation of DNA from a gel using the Dialysis tubing method -Nor
Preparation of Heterologous Salmon Sperm DNA -Nor
Minipreps from transformed bacteria -Nor
Cloning, Blunting and Ligation of DNA fragments -Eng
The PCR -Eng
Restriction digestion analysis of PCR products - Eng
Sequencing DNA fragments using Dynabeads - Nor
Southern Hybridizations and Probe Labeling using Dynabeads -Eng
Probe Labeling by Random Priming -Eng
Bisulphite conversion of DNA-Eng
E. coli Techniques
Making E. coli competant cells by the CaCl2 method -Nor
Making E. coli competant cells by electrotransformation -Nor
E. coli transformation -Eng

RNA Techniques
mRNA isolation using Dynabeads -Eng
Total RNA isolation -Nor
Running a Northern gel -Nor
Reverse transcriptase (RT)- PCR -Eng

Protein Methods
Isolation, Protein Gels -Eng
HMTase assay-Nor
Subcellulær lokalisering av protein-GFP konstrukt-Nor
Library Screening
Lambdology -Eng

Isolation of Plant DNA
Maxiprep Isolation of Plant Genomic DNA -Eng
Miniprep Isolation of Plant Genomic DNA -Eng

Arabidopsis Techniques
Media for Arabidopsis techniques -Nor
Surface sterilization of seeds -Nor
Agrobacterium mediated transformation of Arabidopsis - Eng
Simplified Arabidopsis Transformation Protocol
Agrobacterium Techniques
Media og antibiotica for agrobacterium techniques -Nor
Electrotransformation of agrobacterium -Nor
Ping-pong mating -Nor

Useful Web Links -Eng
DNA-lab. -Eng
Arabidopsis Strategic University Program -Eng

Eng - english, Nor - norwegian

Avd. for molekylærbiologi
Studieretning genetikk
 

Reglement for Laboratorietarbeid ved studieretning genetikk ved Avd. for molekylærbiologi (norwegian)

En oppsummering av de viktigste reglene man skal forholde seg til ved hovedfagsarbeidet på avdelingen (gjelder alle lab’er).

AVDELINGEN GENERELT

  • De som står på lab’en, forventes å møte opp på Mandagsmøtene.
  • Alle har en posthylle på Avdelingskontoret (hos Åsta), studentene deler hyller.
  • Studentene har rett til bruk av data-nettverket, og kan hente et nettverkspassord fra elektronikktjenesten (U302, ved fytotronen)
  • Vi har felles kjøleskap, kaffetrakter (kaffepenger betales til Solveig), vannkoker og mikrobølgeovn. Kjøkkenet skal holdes ryddig, dette er alles ansvar. Kjøkkenbrukere deler ansvaret for hovedrengjøring.
  • I tillegg til veilederen, er stipendiater og teknikere overordnet hovedfagsstudenter. Hvis en student får motstridende informasjon fra flere overordnede, skal studenten gjøre de impliserte partene oppmerksom på problemet slik at alle kan komme til enighet.
  • Siste mann/kvinne som forlater avdelingen, skal påse at alle apparater er slått av, også kaffetrakter og autoklav. Alle dører til avdelingen skal låses, husk også hjørnerommet, kjøkkenet o.s.v. Det er viktig at lab’ene ikke står åpne uten tilsyn, (uvedkommende har vært observert ved avdelingen tidligere).
  • Man er pliktet til å lese reglementet for instituttet (fås av Solveig) og undertegne at man har forstått reglene.

LAB’EN GENERELT

  • Spising og drikking på lab’ene er ikke tillatt. Frakker skal benyttes på lab’ene (man skal bruke frakker på alle godkjente klasse 2 lab’er).
  • Felles benker skal holdes ryddige.
  • Man skal si ifra om utstyr knuses eller ødelegges, slik at nytt kan skaffes
  • Labene er satt opp med forskjellige arbeidsstasjoner. Hvis man må låne utstyr fra en stasjon, er det viktig at det blir returnert etterpå.
  • Alle flasker og rør skal merkes med navn og dato (og selvfølgelig innhold), de som ikke er merket, blir kastet fra felles lagringsplasser (dette gjelder også lengre inkubering eller om man lager løsninger som står og røres ved en felles benk).
  • Ukens ordensmann skal hver fredag rydde på lab’ene. En liste som beskriver oppgavene, er laget. Hvis man ikke kan rydde på fredagen skal det gjøres tidligere i uken. Oppgaven roterer mellom brukerne av laben.
  • Skittent glassutstyr og tomme spissbokser settes på trillebordet til vask og oppfylling, veldig skittent utstyr (bakteriekultur flasker, flasker med seige løsninger osv) skal skylles på forhånd og settes i vann på trillebordet.
  • En del felles løsninger finnes, men de fleste skal man lage selv. Løsninger skal aldri lånes av andre uten å spørre først.
  • Når nye studenter har spørsmål ang. prosedyrer osv, skal de spørre en stipendiat, en tekniker eller en erfaren hovedfagsstudent (dvs en som med sikkerhet har peiling på det man spør om) og ikke en annen ny student (sikrer at feil informasjon ikke spres).
  • Man skal ikke bruke apparater for første gang uten opplæring. Til videre bruk, anbefales det å bli kjent med bruksanvisninger, som finnes for de fleste apparater.

Bruk og bestilling av reagenser

  • En liste som beskriver hvordan man skal håndtere de oftest brukte farlige stoffer, finnes over vektene på medialab’en. Listen er ikke fullstendig. Man skal alltid lese etikettene på flaskene.
  • Man skal være bevisst på hva man berører når man bruker hansker i forbindelse med håntering av farlige kjemikaljer. Etter å ha brukt hansker i forbindelse EtBr (etidium bromid), radioaktivitet, o.l., skal man skifte hansker.
  • Man skal vite hvor å kaste avfall; vi har gule-bokser ved benkene til brukte spisser, glassavfallsesker, og riskavfallsesker til hhv. radioaktivitet og andre farlige stoffer.
  • Kjemikalier/enzymer/membraner osv må bestilles før de blir brukt helt opp (bestill når det er nok til bare 4-5 brukere etter deg), dette er viktig siden det i noen tilfeller kan ta lang tid når ting må bestilles fra utlandet.
  • Vi er alle ansvarlige for å bestille nytt når ting blir brukt opp. Studenter kan ikke bestille i eget navn. Alle studenter må klarere med en overordnet (stipendiat eller fast ansatt) før bestillinger gjøres. 
  • Det må klareres med stipendiaten koblet til ditt prosjekt eller veilederen hvilken konto som skal belastes.
  • Når man bruker polaroidfilm, radioaktivitet, og geldokpapir skal man skrive opp på regnskapsskjemaene, dette er viktig for å fordele kostnadene på en rettferdig måte.
  • Vi har en fryser på lab’en med en del enzymer fra Promega,  som man kan kjøpe fra. Fyll i skjemaet ved uttak av enzymer ! Skriv også inn i bestillingsboken !

Elektroforesebenken

  • EtBr er kreftfremkallende, man skal alltid ha på seg hansker når dette brukes og generelt i alt arbeid rundt elektroforesebenkene, også på mørkerommet (når man tar bilder av geler). Vær oppmerksom på at pipettene også kan kontamineres.
  • Man skal alltid bruke ansiktskjerm ved UV-lamper.

PCRrommet

  • Man er pliktet til å følge arbeidsregler for PCRrommet.

Mørkerommet

  • Når man tar bilder av geler, skal man skylle gelene med vann først slik at det blir mindre EtBr søl på mørkerommet.
  • Hvis man ikke bruker hansker til å fremkalle filmer, er det sterkt anbefalt å vaske hendene etterpå, siden det ytre rommet også brukes til å ta bilder av EtBr fargede agarose geler (e.g. dørhåndtaket er sannsynligvis kontaminert).

Radioaktivitet

På avdelinger er de enkelte veilederene (Prof. Lambertsson, Prof. Jakobsen og 1.amanuensis Aalen) ansvarlige for at sine stipendiater og studenter blir innført i prosedyrene for arbeid med isotoper. Nye brukere må kontakte sin veileder for avklaring av hvilken stipendiat som skal ta seg av opplæringen.

Helse-, miljø- og sikkerhetsavdelingen (HMS) har skrevet en generell prosedyre for bruk av radioaktivitet ved universitetet. De viktigste punktene står nedenfor (en fullstendig liste er hengt opp på isotoplab’en):

  • Man skal alltid bruke labfrakk, hansker og briller når man arbeider med radioaktivitet (og skal ikke låne frakk av andre).
  • Personer som arbeider med stråling skal bære persondosimeter (fåes fra Solveig; hun skifter ut disse med jevne mellomrom for innsending og kontroll).
  • Arbeid med åpne radioaktive kilder skal bare foregå i godkjente lab’er (isotoplab’en, DNA-lab’en, bygglab’en) og ved godkjente benker som er tydelig merket.
  • Når radioaktiviteteten ikke er i bruk, skal den oppbevares på en godkjent lagringsplass (de merkede kjøleskapene).
  • Det skal føres kontroll av mulig forurensning i bruksområder som benker og skjermer og av alt utstyr som har vært i kontakt med radioaktivitet (pipetter, stativer, varmeblokker). Dette betyr at hver bruker kontrollerer fellesutstyr med geigerteller både før og etter bruk.
  • Man skal kontrollere at hendene ikke er kontaminert og vaske hendene etter bruk.
  • Hvis utstyr eller benker blir forurenset, skal renseprosedyrer gjennomføres (med Deconex) av brukeren.

Som en ekstra kontroll er det blitt innført en logbok, hvor alle som jobber på isotoplab'en skal skrive seg inn med navn, dato, type arbeid, pluss hvilken del av lab'en som er blitt benyttet. I denne skal det også noteres at man skal sjekke arbeidsplassen før og etter man jobber.

Hver uke blir gulvet i lab'en sjekket for kontaminering før vaskepersonalet skal vaske gulvet. Resultatet av kontrollen blir skrevet på en liste som henger rett utenfor isotoplab'en.

Hverken HMS-avdelingen eller Biologisk institutt har kommet med klare regler for midlertidig lagring av radioaktivt avfall. Her oppsummeres avdelingens egen protokoll:

  • Radioaktive løsninger skal lagres i flasker merket med dato bak en skjerm inntil strålenivået synker til bakgrunnsnivået. Det skal da helles i vasken med rennende vann.
  • Radioaktive spisser, rør, papir osv skal samles i egne merkede gule avfallsbokser (35S) eller riskavfallsposer i skjermet eske (32P) (Etter bruk tømmes innholdet i 35S boksene i 32P eskene). Når 32P posene blir fulle, pakkes de i riskavfallsesker som er merket tydelig på toppen med 32P og dato. Disse blir lagret ved avdelingen inntil strålenivået synker til bakgrunn. Da fjernes 32P-merket, og de fraktes av ordensmannen til avfallsburet.
  • Halveringstiden på 32P er ca. 14 dager, 35S er på ca. 3 måneder.

Disse reglene (og ekstra veiledende informasjon) har vært godkjent av alle veiledere ved avdelingen samt avdelingsrådskomiteen og verneombudet den 12. desember, 1995.

Alle er forpliktet til å gjøre seg kjent med disse reglene og til å følge dem.

Professor Reidunn B. Aalen, Avdelingsbestyrer, den 1.9.2000.




Ansvarlig: Reidunn B. Aalen, Avdelingsbestyrer
Webteknisk: webmaster@bio.uio.no
Oppdatert 13.09.00 av TAT