Somasundaram Satkunarasa - tidligere student

Somasundaram, Satkunarasa var ferdig utdannet kjemiingeniør fra kjemilinjen ved IU våren 2000. Ved kjemilinjen valgte han studieretning for analytisk kjemi. Nå jobber han med preparativ væskekromatografi ved ved Amersham Health i Oslo. Her står han ved siden av mobilfase reservoar til HPLC kjøring. Beholderne tar henholdsvis 100 L og 150 L. Kolonnen er 10 cm i diameter og 40 cm lang.  Nedenfor finner du litt informasjon om preparativ væskekromatografi.

Preparativ væskekromatografi er en renseprosess som brukes like mye i forskningsøyemed som i industriell sammenheng i legemiddel- og næringsmiddelindustrien. Tradisjonelt sett er teknologien mye brukt til isolering av naturprodukter. Imidlertid har de siste tiårs satsning på organisk syntese av virkestoffer som inngår i ulike legemiddelprodukter, bidratt til et økende behov for kromatografisk rensing. Fremstilling av mer komplekse substanser bringer ofte med seg dannelse av uønskede biprodukter som er vanskelig å fjerne ved tradisjonelle rensemetoder.

Deteksjonsgrensene i analysemetodene flyttes mot lavere og lavere grense samtidig som legemiddelmyndighetene stiller høyere krav til renhet av virke- og hjelpestoffer i produktformuleringer. I mange tilfeller dreier det seg om å separere fra (fjerne) forurensninger/uønskede biprodukter som ligner produktet selv i kjemisk struktur og egenskaper. En styrke ved kromatografi er at tilstedeværende biprodukter kan isoleres rene nok for identifikasjon samtidig som rent produkt produseres. Kromatografisk rensing kjennetegnes ofte med hurtighet og jevnt høy kvalitet på produkt.

Utfordringen er å tilby betingelser som skiller strukturelt like forbindelser fra hverandre. Ved å pumpe en flerkomponentblanding i væskefase gjennom en kolonne pakket med små uniforme rigide partikler, vil etterhvert separasjon oppstå basert på interaksjoner mellom komponentene og pakkematerialet. Oppholdstiden i kolonnen etter en injeksjon av en flerkomponentblanding kan reguleres med løsningsmiddelblandingen som pumpes gjennom kolonnen. I det komponentene forlater kolonnen vil de kunne detekteres som topper og kan ledes ned i passende oppsamlingsflasker. For å kunne oppkonsentrere produktet i etterkant, er det en forutsetning at produktets kokepunkt er høyere enn løsningsmidlene som brukes til separasjonen.

I Amersham Health og tidligere Nycomed har vi brukt kromatografi til å renfremstille referansesubstanser og isolere biprodukter i R&D siden slutten av nittensyttiårene. Kolonnene er større med større væskehastigheter sammenlignet med analytisk HPLC. Videre belastes kolonnene med langt mer produkt injisert per gram kolonnemateriale enn når formålet er analyse. Instrumentering av ulik størrelse med ulik kapasitet tilpasses behovet for rensing av ulike produkter. Teknikkene vi har anvendt er omvendt fase-, rettfase-, og ionebytterkromatografi på en lang rekke av ulike kolonnematerialer.

Vi har også brukt teknologien til å renfremstille de første mengdene substans når prosjektet har vært i en tidlig utviklingsfase. Mengder fra gram til 4-5 kg er renset. Det nye er bruken av HPLC som den valgte industrielle rensemetode i forsyningen av substans tilde kliniske faser og i kommersiell produksjon.

1. Nye metoder testes først ut på en "mindre" kolonne. Denne er 2 cm i diameter og 25 cm lang.	2. Nye metoder testes først ut på en "mindre" kolonne. Denne er 2 cm i diameter og 25 cm lang.
3. Deretter går man over til en noe større kolonne. Denne er 5 cm i diameter og 25 cm lang.	4.Løsningsmiddelreservoarene  for mobilfase til den største HPLC kolonnen.
5. Løsningsmiddelreservoarene for mobilfase til den største HPLC kolonnen. Den største preparative kolonnen er 10 cm i diameter og 40 cm lang.	6. Kontrollrommet
7. Inndampere for oppkonsentrering av prøven.	8. Prøvene frysetørkes. Al-folien avmagnetiserer stoffer i prøven slik at prøven blir enklere å håndtere etter frysetørking.